Jak se používají sérologické testy pro diagnostiku?

Serologie (z latinského sérum - sérum), nazývaná vědou o vlastnostech krevní sérum osoba Definice sérologických reakcí bude uvedena níže.

Jednou z hlavních úkolů serologie je vývoj metod pro výrobu specifických sér pro diagnostiku a léčbu, hodnocení stupně jejich aktivity a stanovení mechanismů expozice člověka. Sérologický krevní test je laboratorní výzkumná metoda pro stanovení antigenů nebo protilátek (specifických proteinů) pacienta, které obsahuje pacientské krevní sérum. Sérologické studie se nepovažují za 100% specifické a citlivé v diagnostice infekčních onemocnění. Hodnocení výsledků výzkumu je tedy možné pouze při zohlednění klinického obrazu choroby jako celku. Odborníci upřednostňují přesnější diagnostiku několika testů.

Sérologické reakce - co to je?

V laboratorní diagnostice většiny infekčních onemocnění se používá metoda detekce protilátek produkovaných v krvi pacienta v patogenních antigenech. Používají se v lékařské praxi již od počátku dvacátého století. S rozvojem vědy se moderní lékaři naučili identifikovat antigeny ve struktuře mikrobů a také odhalili chemický vzorec jejich toxinů. To umožnilo vyvinout séra určená nejen pro léčbu, ale i pro diagnózu infekčních onemocnění. Sérum je produkováno podáváním atenuovaných patogenů laboratorním zvířatům. Nastavení sérologických reakcí je nyní velmi populární.

Po standardním čase expozice se připravují přípravky z krve laboratorních zvířat. Používají se v sérologických reakcích k identifikaci mikrobů nebo jejich toxinů. Metoda je založena na imunitní odpovědi lidského těla. Tato studie se používá při diagnostice infekčních onemocnění pro identifikaci přítomnosti nebo nepřítomnosti protilátek u pacienta proti jakýmkoli virům nebo bakteriím, stejně jako k určení krevní skupiny. Externí projevy sérologických reakcí závisejí na podmínkách chování a stavu, v němž jsou antigeny v krvi pacienta. Pokud se mikroby nerozpustí, sraženina, lýza, vazba nebo imobilizace v séru. Pokud dojde k rozpouštění antigenů, pak je zjištěn fenomén neutralizace nebo srážení. Sérologické reakce se používají po dlouhou dobu.

Studijní materiál

Při provádění sérologické studie používající částice biologického materiálu shromážděné od pacienta: krev, sliny, výkaly. V mnoha případech se zkoumá materiál shromážděný v některých environmentálních objektech: voda, zemina.

Jak přesně jsou serologické reakce prováděny v mikrobiologii?

Způsob sběru biologického materiálu

Při této analýze není nutné pacienta konkrétně připravit. Odběr vzorků krve se provádí ráno před jídlem v ošetřovně lékařské instituce za použití standardních hematologických metod. Pro tuto analýzu se vzorkování krve provádí dvěma způsoby: ze žilní žíly se odebírá žilní krev a z prstu se odebírá kapilární krev. Materiál pro analýzu je ve sterilních uzavřených zkumavkách.

Co je zapotřebí pro nastavení sérologických reakcí?

Charakteristiky přepravy a skladování biologického materiálu

Bezprostředně po podání krve je transportován do speciální laboratoře, kde je připraveno sérum ve stejný den. Uchovávejte jej v chladničce nejvýše čtyři až šest dní při teplotě 2 až 4 stupně. Pokud chcete udržovat sérum po delší dobu, je zmrazené. Aby nedošlo k porušení kvality biologického materiálu, může být zmrazení a rozmrazování provedeno pouze jednou. Dlouhodobé uchovávání činí protilátky neaktivní a ztrácejí některé z jejich vlastností. Imunoglobuliny třídy M jsou považovány za nejcitlivější pro nižší skladovací teploty.

Po rozmrazení syrovátky se dobře smíchá, aby se získala homogenní kompozice. Pomáhá obnovit koncentraci protilátek obsažených v tomto materiálu.

Sérologické studie - na co se používá?

Metoda sérologických reakcí se používá k diagnostice echinokokózy, trichinózy, toxokarózy, opisthorchiázy, cysticerkózy, toxoplazmózy, amebiázy, giardiózy. To je zapotřebí k určení účinnosti předepsaného průběhu léčby, stejně jako ke zjištění opakování onemocnění, které následovalo po zotavení pacienta. Kde je nejčastější použití sérologických reakcí?

Základní diagnostické metody

Mikrobiologové a imunologové ve většině případů aplikují reakci aglutinace, srážení, neutralizaci, reakci s účinkem komplementu s použitím značených protilátek a antigenů (radioimunologické, imunofermentální, imunofluorescenční metody).

Aglutinační reakce (RA)

Sérologický aglutinační test se provádí zcela jednoduše a zároveň velmi jasně. To vám umožní rychle určit, zda antigeny obsahují sérum od pacienta. Reakce se používá k diagnostice břišní tyfus paratyfid a tyfus. Je založen na specifické interakci mezi lidskými protilátkami (aglutininy) a mikroby (aglutinogeny). V procesu jejich interakce dochází k precipitaci tvorby částic. To je pozitivní znamení. Pro reakci můžete použít živé nebo usmrcené mikrobiální činidla, houby, prvoky, krevní buňky a somatických buněk. Chemická studie se provádí se dvěma fázemi: v prvním stupni se protilátky smísí s antigeny a následně se během reakce sráží (aglutinát se tvoří).

Sérologická diagnostická metoda může být odlišná.

Reakční nepřímá aglutinácia (RPGA)

Tato reakce je považována za citlivější než předchozí. Používá se k diagnostice onemocnění způsobených různými bakteriemi, intracelulárními parazity, protozoá. Tato analýza může detekovat koncentraci protilátek, a to i ve velmi malých množstvích. Pro jeho zavedení je nutné použít čištěné červené krvinky z ovčích a lidských červených krvinek, které jsou předem ošetřeny protilátkami nebo antigeny (v závislosti na tom, co chtějí najít v laboratoři). V některých případech použití lidských imunoglobulinů červených krvinek. Sérologická reakce červených krvinek se považuje za udržovanou, pokud se na spodní straně zkumavky vysráží červené krvinky. Když jsou buňky umístěny ve formě obrácené kopule a zabírají celé dno trubice, znamená to pozitivní reakci. Negativní reakce se zvažuje, pokud jsou červené krvinky uloženy ve formě sloupce nebo tlačítka ve středu dna.

Sérologické testy na syfilis jsou prováděny.

Reakční srážení (RP)

Pro identifikaci extrémně malých částic antigenů se používá srážecí reakce. Může se jednat o protein (nebo jeho část), sloučeniny bílkovin, lipidů nebo uhlohydrátů, částečně zastoupené bakterie a jejich toxiny. Sérum pro analýzu za použití této reakce se získá infikováním laboratorních zvířat, obvykle králíků. Tato metoda se používá k získání téměř jakéhokoliv vysráženého séra.

Mechanismus sérologické precipitační reakce je v účinku podobný aglutinační reakci. Protilátky, které jsou obsaženy v séru, jsou smíchány s antigeny koloidní roztok připojení k velkým proteinovým molekulám. Tyto molekuly jsou uloženy na dně zkumavky nebo na gelovém substrátu. Tato verze studie je považována za velmi přesnou a s její pomocí lze zjistit i zanedbatelné dávky látky. Srážková reakce, která se také široce používá ve forenzním lékařství, umožňuje diagnostikovat mor, tularemii, antrax, meningitidu.

Reakce tohoto typu se provádějí nejen v kapalném médiu, ale pro tento účel používají agarový gel. Tento postup se nazývá metoda difúzního srážení. Poskytuje příležitost ke studiu komplexních antigenních směsí. V gelu se protilátky a antigeny pohybují směrem k sobě s různými rychlostmi a po setkávání vytvářejí srážkové linky, na nichž se vyvozuje závěr.

Co jiného je známo metoda sérologické reakce?

Neutralizační reakce (PH)

Anti-toxické séra neutralizují působení exotoxinů produkovaných mikroorganismy. Sérologická odezva tohoto typu je založena na této interakci. V mikrobiologii se tato metoda používá pro titraci sér, toxinů a toxoidů, stejně jako označení jejich terapeutické aktivity. Navíc pomocí této reakce můžete určit identitu exotoxinu určitému typu nebo typu. Tetanus, záškrt a botulismus jsou diagnostikovány tímto způsobem. Studie se provádí jak na tabletě, tak v gelovém substrátu.

Pro další testy se také používají sérologické reakce.

Reakce lýzy (RL)

Sérum, které vstupuje do těla pacienta, je kromě hlavního funkčního úkolu poskytnutí pasivní imunity vybaveno rozpouštěcími vlastnostmi. Přispívá k rozpouštění mikrobů, buněčných cizích prvků a virů vstupujících do těla pacienta. V závislosti na složení protilátek se sérum dělí na bakteriolysiny, cytolyziny, spirochetolysiny, hemolyziny a další. Tyto protilátky se nazývají komplimenty. Protilátky obsahují téměř všechny tekutiny lidského těla, mají složitou proteinovou strukturu a jsou velmi citlivé na zvýšené teploty, třepání, vystavení kyselinám a přímému slunečnímu záření. Ale v suchém stavu dokáží udržet své vlastnosti pro lýzu po dobu až 6 měsíců.

Následující sérologické reakce tohoto typu krve se provádějí: bakteriolýza, hemolýza.

Bakteriolýza se provádí s použitím séra pacienta a specifického imunitního séra s aktivními mikroby. Pokud je v krvi dostatek komplimentů, laboratorní technik bude svědkem lýzy bakterií a reakce bude považována za pozitivní. Druhým typem sérologické reakce tohoto typu je to, že erytrocyty pacienta jsou zpracovávány za použití séra, které obsahuje hemolyziny, které se aktivují pouze v případě, že existuje nějaký druh komplimentu. Pokud je přítomen, výzkumník pozoruje rozpuštění červených krvinek. Tato metoda se používá při provádění Wassermanovy reakce (syfilis).

Komplexní vazebná reakce (RSK)

Tato studie se používá k detekci protilátek proti infekci v krvi pacienta a k identifikaci patogenů jejich antigenní strukturou. Všechny předchozí popsané reakce jsou považovány za jednoduché. CSC je komplexní reakce, protože zahrnuje dvě, ale tři složky: protilátku, antigen a kompliment. Podstata spočívá v interakci mezi protilátkou a antigenem, která se vyskytuje pouze v přítomnosti proteinů komplementu adsorbovaných na vrcholu vytvořeného komplexu AG-AT. Antigeny po přidání komplimentu se významně mění, jsou to tyto transformace, které ukazují kvalitu reakce. Může to být lýza, hemolýza, imobilizace, baktericidní nebo bakteriostatický účinek.

Výše uvedené reakce se navzájem liší výrobní technikou, ale všechny z nich mají v podstatě reakci interakce antigen-protilátka a používají se k jejich identifikaci. Existuje několik typů sérologických reakcí s podobným principem účinku.