Středa Endo. Složení a příprava živného média

19. 5. 2019

Každý milovník mikrobiologie ví, že kultivace jakékoliv kolonie vyžaduje vhodné živné médium. Každé živné médium má zároveň své vlastní vlastnosti, jak při přípravě, tak při použití. Pokud se rozhodnete vyrůst kolonii enterobakterií, budete potřebovat Endovo prostředí. Právě tento článek je o tom.

Co je to živné médium?

Středa endo

Prostředí Endo se používá k odstranění enterobakterií a má diferenciální diagnostický charakter. Proč se tomu říká? Je to velmi jednoduché - je pojmenováno podle jeho objevitele - Shigeru Endo. Jedná se o slavného mikrobiologa japonského původu.

Jaká je zvláštnost tohoto prostředí?

Není žádným tajemstvím, že v mikrobiologii existuje koncept gram-pozitivních a gramnegativních bakterií. Takže pokud se rozhodnete pro růst kolonie gramnegativních bakterií, potřebujete takové prostředí, které brání růstu gram-pozitivních bakterií. Tuto funkci lze snadno spravovat prostredím Endo. Díky svým selektivním vlastnostem zabraňuje vývoj gram-pozitivních kolonií.

Střední složení

Vlastnosti každého prostředí závisí především na složkách. Složení prostředí Endo zahrnuje:

  • síran sodný;
  • fosfát sodný;
  • peptonový agar z masa;
  • purpurová;
  • uhličitan sodný;
  • laktóza.

Vzhledem k nízkým nákladům na přípravu je endo prostředí velkým požadavkem mezi amatérskými mikrobiology.

Jaký je princip životního prostředí?

Sulfid sodný a fuchsin přítomné ve svém složení přispívají k tvorbě Schiffova činidla. To znamená, že sulfid sodný změní barvu fuchsinu. Výsledkem této reakce je tvorba kyseliny fuchsírové.

E. coli

Každý ví, že enterobakteriální kolonie jsou schopny fermentovat laktózu, během této reakce vzniká kyselina mravenčí. Z průběhu chemie je známo, že kyselina mravenčí interaguje s aldehydy a dává kvalitní reakci. Kvůli tomu bude kolonie enterobakterií namalována v růžově purpurové barvě. Jiné gram-pozitivní bakterie (s výjimkou enterobakterií) nemohou získat laktózu, takže nebudou barveny.

Výsledkem je, že na Petriho misce se objeví pouze enterobakterie ve formě karmínových tyčinek s Endo médiem, které mají růžovou barvu. Všechny ostatní kolonie budou buď zničeny, nebo nebudou vystupovat na pozadí živného média.

Vaření živinového substrátu

Kolonie bakterií

V mikrobiologii je prostředí Endo jedním z nejdůležitějších živin. Chcete-li připravit takový substrát, postupujte podle níže uvedených pokynů.

1. Vařící vývar. Jakékoli maso nebo kosti se zbývajícím masem udělají, musíte co nejvíce odstranit tuky a šlachy. Maso vařte asi 20-25 minut při 100 stupních. Po ochlazení vývaru zmrazí kapky tuku.

2. Výsledný vývar se filtruje přes hustý bavlněný filtr na absolutní průhlednost. Je třeba poznamenat, že filtrace přes gázu je nežádoucí, protože hrozí nebezpečí zasažení malých kusů masa.

3. Zvažte zbývající složky. Musíme vytvořit suché prostředí a připravit Schiffovo činidlo. K tomu musíte vážit:

  • pepton 1,3 g;
  • laktóza 1 g;
  • agar 2 g;
  • Fuchsin 0,2 g

4. Přidejte fuchsin do 30 ml vody a mixujte fuchsin vodou. Pak přidejte koncentrovaný roztok siřičitanu sodného, ​​dokud fuchsinová barva nezmizí.

5. Vysráží se sraženina kyseliny fuchsírová, přičemž tato sraženina se odstraní filtrací.

6. Přidejte horké médium do horkého vývaru.

7. Počkejte na rozpuštění a přidejte Schiffovo činidlo.

8. Výsledný substrát se sterilizuje asi 30 minut při teplotě asi 125 ° C.

Výsledky plodin musí trvat asi 5 dní, ale čím déle držíte, tím jasnějším výsledkem budou kolonie bakterií.