Analýza ELISA: přepis

Enzymová imunoanalýza (ELISA) je metoda testování krve v laboratoři na základě vyhledávání speciálních buněk - protilátek proti různým onemocněním. Metoda umožňuje nejen identifikovat patogen, ale také stanovit, v jakém stadiu je patologický proces. Tato metoda je velmi důležitá pro prognózu a další léčbu pacienta.

Výhody a nevýhody metody

Mezi všemi moderními diagnostickými metodami je metoda ELISA nejinovativnější a technicky přesnější. Jeho hlavní výhody jsou:

1. Schopnost vyhledávat všechny existující protilátky proti infekčním chorobám v krvi pacienta.
2. Vysoká dostupnost metody výzkumu. Každá střední laboratoř může dosud provádět analýzy ELISA.
3. Téměř 100% specifičnost a citlivost metody.
4. Schopnost vyhledávat protilátky a antigeny, stejně jako stanovení fáze patologického procesu a sledování jeho dynamiky, díky porovnání počtu.

Taková řada výhod oproti ostatním zkouškám úplně zastírá jednu nevýhodu analýzy: je schopna detekovat protilátky, ale ne samotný patogen.

Klíčové termíny pro vyhodnocení analýzy

Abyste pochopili, co se děje s analýzou ELISA, jaká je a jak se provádí, musíte se seznámit se základními pojmy používanými odborníky.

1. Protilátka je protein, který je produkován buňkami. imunitního systému lidské (lymfocyty typu B). Odpovídají specifickou reakcí na požití cizí látky nebo látky. Dalším názvem pro protilátky jsou imunoglobuliny, které patří do různých tříd: A, E, M, G. Od sebe se liší hmotnost, rychlost odezvy, poločas a řada dalších charakteristik. Lidská krev obvykle obsahuje většinou imunoglobuliny třídy G. Pokud dojde k nějaké infekci, počet imunoglobulinů A a M prudce stoupá. Imunoglobuliny E účastnit se alergických reakcí.
2. Antigen je cizí látka organického původu a vysoká molekulová hmotnost. Nejčastěji představují patogeny nebo jejich biologicky aktivní látky.
3. Komplex antigen-protilátka nebo imunitní komplex je přímá kombinace cizorodé látky a imunoglobulinu, což vyvolává imunitní odpověď.

Podstata a rozsah metody

Pacienti mají často otázku: ELISA, co to je, jak se provádí a proč je pro ně? Metodu můžete sdělit stručným popisem jejích fází.

Přípravná fáze . Laboratorní lékař používá speciální tabletku, ve které je 96 děr. Na povrch každé jamky byl aplikován antigen specifického patogenu.

Krok 1. Proběhne odběr vzorků krve, který se potom aplikuje po kapkách do studny. V jamce se iniciuje reakce mezi antigenem a protilátkou v krvi.

2. etapa. V reaktoru probíhá reakce s tvorbou imunitních komplexů. Výsledkem je látka určité barvy. Intenzita barvení závisí na množství protilátek v krvi pacienta na každý specifický patogen.

Fáze 3. Vyhodnocení výsledku fotometrií. K tomu použijte speciální zařízení s názvem "spektrofotometr". Slouží k porovnání hustoty materiálu v jamce a kontrolním vzorku. Dále přístroj generuje výsledek matematickou analýzou.

Vyhodnocení výsledků a účelu testu ELISA

Interpretace výsledku závisí na několika důležitých nuáních:

1. Jádra s optickou hustotou.
2. Výrobce desek s otvory (zkušební systémy).
3. Laboratoř, ve které byla studie provedena.

Vzhledem k těmto rozdílům byste nikdy neměli porovnávat dva výsledky z různých zkušebních systémů nebo z různých laboratoří.

Dalším důležitým bodem ovlivňujícím analýzu ELISA je tzv. Avidita protilátek. Tento parametr charakterizuje množství antigenu, pevnost vazby v komplexu "antigen-protilátka". Základem jeho definice je zpracování močovinového imunitního komplexu za účelem vyřešení proteinových struktur. To vám umožní zničit slabé vazby mezi antigenem a protilátkou a nechat pouze silné. Hodnota výzkumu avidity je, že může být použita k zjištění trvání infekce. Tyto informace jsou pro diagnostiku těhotných žen mimořádně důležité.

Krevní test ELISA je následující:

1. Vyhledat různé patogenní antigeny.
2. Pro studium hormonálních hladin.
3. Pro vyšetření přítomnosti autoimunitní patologie.
4. Zjišťovat markery rakoviny.

Odrůdy ELISA

Analýza ELISA má tyto odrůdy:

1. Nepřímé.
2. Přímo.
3. Soutěžní.
4. Metoda blokování

Ve skutečnosti se však dnes používá pouze metody nazvané ELISA (enzýmové imunosorbentní stanovení). Vychází z výše popsané reakce tvorby komplexu antigenu s protilátkou se změnou barvy na povrchu jamky.

Kvantitativní krevní test ELISA si zaslouží zvláštní pozornost. Nejedná se o typ analýzy, ale o způsob vyhodnocení výsledků. Díky němu se počítá počet protilátek a určují se jejich třídy. Výsledek závisí na optické hustotě vzorku, zkušebním systému, na němž byla ELISA provedena, a také na laboratoři.

Nemoci zjištěné testem ELISA

Test ELISA je krevní test, který umožňuje identifikovat obrovské množství různých infekčních onemocnění. Navíc se stejnou přesností detekují jak virové, tak bakteriální onemocnění. Například při použití tvorby imunitních komplexů lze prokázat přítomnost antigenů způsobujících následující nemoci:

1. Virové hepatitidy A, B a C.
2. HIV infekce a AIDS.
3. Epstein-Barr virus.
4. Herpes virus všeho druhu.
5. Cytomegalovirus.
6. Corey
7. Toxoplasmóza.
8. Syfilis a mnoho pohlavně přenosných chorob (STD).
9. Parazitóza a další nemoci.

Navíc ELISA může detekovat:

1. Markery nádorů - TNF (faktor nekrózy nádorů), PSA (prostatický specifický antigen), CEA (rakovinný embryonální antigen), CA-125 (marker nádoru vaječníků)
2. Hormon těhotenství - hCG (chorionický gonadotropin).
3. Poruchy reprodukčního systému: hormony ženského a mužského reprodukčního systému.
4. Patologie štítné žlázy.

Je důležité zmínit, že test ELISA pro HIV dnes je hlavní cestou k diagnostice tohoto nebezpečného onemocnění.

Materiál pro technologii ELISA a plot

Pro provedení testu ELISA u pacienta se krev odebírá na prázdný žaludek. Dále se sérum získává z krve, která se přímo používá k analýze. Kromě toho může být ELISA provedena na mozkomíšním moku (CSF), cervikální hlen kanálek ​​(děložního čípku), plodovou tekutinu a dokonce i sklovou tekutinu (oční bulvy).

Než pacient dostává krev, jsou varováni, že by neměl užívat žádné léky a doporučuje se ukončit léčbu antibiotiky a antivirovými léky nejméně dva týdny před podáním krve.

Načasování přijetí a interpretace výsledků

Načasování odpovědi laboratoře nezávisí na rychlosti její práce, ale v jaké fázi je onemocnění a jaké protilátky se již v krvi objevily. Například: M imunoglobuliny se objevují přibližně 2 týdny po tom, co se krev pro analýzu odebrala, což znamená, že proces je ve fázi primární infekce nebo došlo k exacerbaci chronické infekce. Současně se objevují protilátky tříd M a G během primární infekce. Navíc může být detekována po 4 týdnech.

IgA se objeví po 2-3 týdnech buď samostatně, nebo s M, což znamená akutní infekci nebo G, což naznačuje chronický proces.

Taková různá období vzhledu protilátek v krvi způsobí, že pacient bude dlouho čekat na výsledek. Je přijatelné počkat více než měsíc po provedení testu ELISA. Dekódování a interpretace lékaře také trvá určitou dobu.